O le Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) o se metotia fa'asa'o genome o le tupulaga lona tolu lea ua suia ai le lalolagi i ona taunuuga maualuga. Ua fa'aaogaina e togafitia ai fa'ama'i eseese ma fa'ama'i pipisi. O siama eseese ma isi prokaryotes (e pei o archaea) e iai fo'i faiga CRISPR/Cas9 e puipuia ai mai phages. Ua lipotia mai o fuafuaga fa'avae CRISPR/Cas9 e mafai ona taofia le tuputupu a'e ma le alualu i luma o le kanesa o le susu triple negative (TNBC) e ala i le taula'i atu i genes tete'e e ono suia, transcription, ma le epigenetic regulation. O nei togafitiga fa'afoma'i e mafai ona fesoasoani e foia fa'afitauli faigata e pei o le tete'e atu i vaila'au na matauina e o'o lava i le TNBC. I le taimi nei, o lo'o fa'aaogaina auala eseese e tu'uina atu ai le CRISPR/Cas9 i sela fa'atatau, e pei o le tino (microinjection, electroporation ma hydrodynamic modes), viral (adeno-associated virus ma lentivirus) ma le non-viral (liposomes ma lipid nanoparticles). )-particles). E ui o le tele o faʻataʻitaʻiga ua atiaʻe e suʻesuʻe ai mafuaʻaga faʻamolekula o le TNBC, o le leai o ni metotia maaleale ma faʻatatau mo le tuʻuina atu o meafaigaluega e faʻasaʻo ai le genome i totonu o le tino ola e faʻatapulaʻaina ai lo latou faʻaaogaina i togafitiga faafomaʻi. I se aotelega, o lenei iloiloga e suʻesuʻeina atoatoa ai le alualu i luma, luʻitau, tapulaʻa, ma faʻamoemoega o togafitiga CRISPR/Cas9 mo le TNBC e faʻavae i luga o faʻamaoniga o loʻo iai. Matou te faʻamamafaina foʻi pe faʻapefea ona faʻaleleia e le tuʻufaʻatasiga o le atamai faʻapitoa ma le aʻoaʻoina o masini ia fuafuaga CRISPR/Cas9 i togafitiga o le TNBC.
O le kanesa e fa'ailoaina i le vaevaega o sela e le pulea, fa'alavelaveina o siaki o le ta'amilosaga o sela, ma fesuia'iga i totonu o kene e taofia ai le tumo (TSGs) (Matthews et al., 2022). I totonu o ituaiga eseese o kanesa, o le kanesa o le susu o le ituaiga kanesa e sili ona taatele i fafine ma e maualuga le fua faatatau o le oti i le lalolagi atoa (Waks ma Winer, 2019). O le kanesa o le susu o se fa'ama'i eseese e eseese ona uiga, e pei o foliga fa'asolopito ma fa'aletino, fa'aaliga ma amioga fa'aklinikal, ma le tali atu i togafitiga (Weigelt et al., 2010). O le fa'avasegaina o le kanesa o le susu e maua ai ni malamalamaga sa'o mo le su'esu'eina o le kanesa o le susu ma le fa'amaoniga o le tumo. O le fa'aaogaina o biomarkers masani ma foliga fa'aklinikal ua avea ma ta'iala autu mo le fa'avasegaina o le kanesa o le susu (Tsang ma Tse, 2019). O le fa'amaoniga ma le tali atu i togafitiga o le kanesa o le susu e a'afia i le tele o mea, e aofia ai le i ai o le estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), human epidermal growth factor receptor 2 (HER2/neu), ma le tulaga fa'asolopito, ituaiga o tumo, ma le tulaga. tele ma le metastasis o le lymph node (Al-Tubaiti, 2020). E lima ituaiga molecular intrinsic o le kanesa o le susu ua fa'ailoaina, e aofia ai le luminal A, luminal B, HER2-enriched, basal-like, ma le claudin-low (Prat et al., 2015). O le TNBC o se ituaiga molecular o le kanesa e le fa'aalia uma ai le ER, PR, ma le HER2 (Yin et al., 2020). O nei foliga fa'ama'i e feso'ota'i ma le TNBC, ma fa'amaonia ai lona vave alualu i luma ma le natura sili atu ona malosi nai lo se isi lava ituaiga o kanesa o le susu (Feng et al., 2018). E le gata i lea, na fa'aogaina e Peru et al (2000) le tekonolosi microarray e toe fa'avasega ai le kanesa o le susu ma fa'ailoa ai ituaiga e lima o le kanesa o le susu (Cadenas, 2012). O le basal-like breast cancer o se ituaiga o kanesa o le susu e iai le phenotype triple-negative ma e feso'ota'i ma le vave alualu i luma. E tatau ona maitauina o kanesa uma o le susu basal-like e masani ona sese le fa'amaoniaina o le TNBC, ae na'o le 77% o TNBC; I se faatusatusaga, e 71–91% o TNBC e pei o le basal, o lona uiga o nei ituaiga e lua o le kanesa o le susu e tutusa ma e eseese faʻavasegaga (Wang D.-Y. et al., 2019). O lenei mea e mafua ai le manaʻoga e faʻamatalaina le eseesega o le TNBC e faʻamalamalamaina ai le vaʻaiga ma faʻailoa ai tali e ono tulaʻi mai i togafitiga o loʻo iai nei ma le lumanaʻi. E le gata i lea, o le TNBC e 15–20% o mataupu uma o le kanesa o le susu ma e sili atu ona taatele i fafine e i lalo ifo o le 50 tausaga le matutua. Ua lipotia mai suiga o le BRCA1 poʻo le BRCA2 i le tusa ma le 20% o mataupu o le TNBC (Xie et al., 2017; Tzikas et al., 2017). , 2020). Ua faʻaalia foʻi e suʻesuʻega o loʻo iai i le TNBC se siosiomaga puipuia tulaga ese e aofia ai le maualuga o le vascular endothelial growth factors, tumor-associated macrophages (TAMs), tumor-infiltrating lymphocytes (TILs), ma isi mole mole e aʻafia i le tuputupu aʻe ma le femalagaiga o le tumo. O le mea lea, o le malamalama i le siosiomaga fa'aitiiti o le TNBC e taua tele mo lona va'aiga ma togafitiga (Fan ma He, 2022).
Ina ia iloiloina le tulaga o le TNBC ma ia mautinoa le togafitiga lelei, e taua tele le sa'o o le su'esu'ega, e fa'avae tele i luga o le immunohistochemistry (IHC) e iloa ai le ER, PR ma le HER2, ma le mammography e iloa ai neoplasms o le susu. Peita'i, e le mafai e le mammography ona fa'aalia lelei foliga o totonu o le tumor e pei o le necrosis ma le fibrosis (Deepak Singh et al., 2021). Talu ai ona o le leaga o le tulaga o le ma'i ma le su'esu'ega e taofia ai foma'i mai le tu'uina atu o vaila'au sa'o (Chaudhary, 2020), e fa'aaogaina ai auala eseese e fa'aleleia atili ai le tausiga o gasegase e iai le TNBC. I le taimi nei, e lua vaila'au, o le doxorubicin ma le cyclophosphamide, e fa'aaogaina i gasegase e iai le TNBC ma ua fa'aalia ai ni taunuuga lelei. E le gata i lea, o isi vaila'au platinum e fa'aaogaina, e pei o le carboplatin ma le cisplatin (Sikov et al., 2015). E le gata i lea, o PARP inhibitors e pei o le Olaparib, Velaparib, ma le PF-01367338 ua fa'aaogaina o ni vaila'au chemotherapy e ono mafai ona togafitia ai le TNBC (Ishino et al., 2018). Talu ai ua lipotia mai o loo aʻafia auala faʻailoilo a le Wnt/b-Catenin, NOTCH, ma le Hedgehog i le tutupu ma le alualu i luma o le TNBC, o le faʻatatauina o vailaʻau i nei auala atonu o se fuafuaga taua (Aysola et al., 2013). E ui o loo tumau pea le taotoga, togafitiga faʻavevela ma le chemotherapy o le autu lea o togafitiga mo le TNBC i aso nei, ae ua tele le alualu i luma ua faia i le atinaʻeina o togafitiga fou e aofia ai togafitiga faʻapitoa, togafitiga puipuia o le tino, meafaigaluega eseese e faʻasaʻo ai kene e fesoʻotaʻi ma le CRISPR e pei o le Cas9n, dCas9. , CRISPR/Cas12, faʻasaʻo muamua, ma le togafitiga kene e faʻatatau i le CRISPR/Cas9. O iinei o le a tatou taulaʻi atu ai i meafaigaluega eseese e faʻasaʻo ai kene e fesoʻotaʻi ma le CRISPR e faʻaaogaina i le togafitia o le TNBC. O nisi o ia mea, ua maua ai e le lautele le gauai atu i le CRISPR/Cas9.
O le Cas9n, e ta'ua fo'i o le Cas9 nickase, o se fa'asologa fa'atekinolosi fa'akeneka o le porotini Cas9 e maua mai le faiga fa'asa'o o le genome CRISPR/Cas9 (Gupta et al., 2019). I lona tulaga muamua, o le porotini Cas9 e aofia ai vaega nuclease e lua: RuvC ma le HNH, o le galuega autu o le vaeluaina o manoa DNA uma e lua. Peita'i, i le Cas9n, o se tasi o vaega nuclease, HNH, ua suia fa'akeneka ma ua le toe galue. O le mea lea, o le vaega HNH o le Cas9n e tumau pea le le galue. Na'o le vaega RuvC e tumau pea le galue, e mafai ai e le Cas9n ona tipi pe faia ni motusia i manoa DNA ta'itasi (Trevino ma Zhang, 2014). Pe a fa'atusatusa i le Cas9, e mafai e le Cas9n ona fa'aitiitia lelei a'afiaga e le o fa'atatauina ma fa'aleleia atili ai auala e toe fa'aleleia ai sela. E mafai ona fa'aaogaina le Cas9n e fo'ia ai fa'afitauli eseese, e pei o le faia o ni motusia i nofoaga fa'apitoa i le DNA e lua manoa. Mo lenei fa'amoemoe, e lua mole mole Cas9n na tu'ufa'atasia ma fa'aaoga fa'atasi (Yee, 2016). O le Mixed lineage kinase 3 (MLK3) o se mitogen-activated protein kinase e avea o se fa'atonutonu autu i le taimi o le TNBC metastasis (Cronan et al., 2012).
E mafai e le MLK3 ona fa'agaoioia le tele o auala fa'ailoilo e o'o atu ai i le metastasis o le TNBC. Mo se fa'ata'ita'iga, o le auala c-Jun N-terminal kinase (JNK) e fa'atonutonuina ai le gaioiga o le sela ma le fa'aleagaina o le extracellular matrix, ma e fa'agaoioia e le MLK3 le auala JNK, ma fa'aleleia atili ai le gaioiga o le sela ma maua ai meatotino fa'alavelave (Rattanasinchai ma Gallo, 2016). E fa'atonutonuina fo'i e le MLK3 le EMT. Ina ia faia lenei mea, e fa'agaoioia ai mea fa'aliliuina i lalo e pei o le Snail, Slug ma le Twist. O nei mea e taofia ai le fa'aalia o fa'ailoga epithelial ma fa'alauiloa ai le fa'aalia o fa'ailoga mesenchymal, e o'o atu ai i le mauaina o se phenotype metastatic (Casalino et al., 2023). Ua matauina le MLK3 e iai sona sao i le toe fa'aleleia o le ECM ma le fa'agaoioia o proteases e pei o le matrix metalloproteinases (MMPs) e fa'aleagaina ai le ECM. E fa'afaigofieina ai le osofa'iga a le sela o le tumo ma le salalau atu i nofoaga mamao (Katari et al., 2019). O lea la, o su'esu'ega ua mavae ua fa'aalia ai o le MLK3 e iai sona sao taua i le TNBC. Na fa'aaogā e Rattanasinchai ma Gallo fa'ata'ita'iga TNBC e su'esu'e ai le matafaioi a le MLK3 ma maua ai e fa'alauiloa ai le atina'eina o le kanesa e ala i auala fa'ailoilo fa'apitoa. Na la fa'aaogāina le CRISPR/Cas9n e fa'asa'o ai le MLK3 ma matauina ai se fa'aitiitiga tele i le metastasis o le TNBC (Rattanasinchai ma Gallo, 2016).
O le dCas9, e masani ona ta'ua o le Cas9 e le o galue malosi, o se ituaiga ua suia o le porotini Cas9. E le pei o le Cas9 e galue malosi, e leai se gaioiga endonuclease a le dCas9, ma e le mafai ai ona fa'aosofia le motusia o le DNA. O le mea lea, e mafai ona fa'aogaina le dCas9 e fa'atatau tonu ai vaega patino o le genome e aunoa ma ni suiga po'o ni fa'asa'oga i le fa'asologa o le DNA (Wang et al., 2016). I le dCas9, e lua porotini endonuclease, RuvC ma HNH, e fa'agata e ala i le taofia o toega taua o amino acid. (Richter et al., 2016). E ui lava i le leai o se gaioiga o le tipiina o le DNA, ae o le dCas9 e tele ana matafaioi taua i su'esu'ega fa'asolopito ma biotechnology. Mo se fa'ata'ita'iga, e mafai ai ona va'aia vaega patino o le genome, fa'afaigofieina le fa'atonutonuina o tusitusiga, ma fa'alauiloa ai suiga o epigenetic (Brocken et al., 2018).
O le transcription factor ZEB1 (zinc finger E-box binding homeobox 1) e iai sona sao taua ma faapitoa i le fa'atonutonuina o le epithelial-mesenchymal transition (EMT), o se fa'agasologa o le sela e tupu i le taimi o le atina'eina o le embryonic, toe fa'aleleia o a'ano, ma le alualu i luma o le kanesa. E aofia ai le liua o sela epithelial i sela mesenchymal, ma i'u ai i suiga i le morphology o le sela, gaioiga, osofa'iga, ma isi mea. (Wu et al., 2020). E taofia e le ZEB1 le tele o fa'ailoga epithelial, e pei o le E-cadherin ma le Occludin, o lo'o nafa ma le fa'atumauina o le pipii o le sela ma le polarity o sela epithelial i le TNBC (Moreno-Bueno et al., 2008). E le gata i lea, e fa'agaoioia e le ZEB1 nisi fa'ailoga e pei o le N-cadherin, vimentin ma le fibronectin (Konradi et al., 2014) ma fa'atonutonuina fo'i genes e a'afia i le toe fa'aleleia o le cytoskeletal e pei o le Rho GTPases ma le matrix metalloproteinases (MMPs) (Huang). et al., 2014). 2022), e le gata i lea, e aʻafia ai foʻi auala faʻailoilo eseese e pei o le transforming growth factor-β (TGF-β), Wnt signaling, ma isi, ma faʻalauiloa ai le osofaʻiga a le tumo ma le metastasis i le TNBC (Chen et al., 2016). ). O le tele o suʻesuʻega ma faʻamaoniga faasaienisi e faʻaalia ai o le ZEB1 e iai le gafatia tele e avea o se sui taua mo le iloa ma le togafitiga faʻafomaʻi o le TNBC. I se suʻesuʻega talu ai nei, na faʻaaogaina ai e Waryah et al. se faʻataʻitaʻiga TNBC ma ausia ai le taofiofia atoatoa o le ZEB1 e le dCas9. O lea la, na latou matauina ai le maualuga tele o le faʻapitoa ma toetoe lava a taofia atoatoa le ZEB1 i tulaga in vivo (Waryah et al., 2023).
O le CRISPR/Cas12 o se meafaigaluega e fa'asa'o ai kene ua ta'ua o le CRISPR/Cpf1. E mafua mai i le faiga CRISPR/Cas, lea e fa'asino i ai le upu Cas12 i le porotini e feso'ota'i ma le CRISPR 12 (Bharathkumar et al., 2022), lea e matua tutusa lava ma le Cas9. Pau lava le eseesega o lo'o i ai le porotini Cas12. Pe a fa'atusatusa i le Cas9, o lo'o i ai i le Cas12 ni galuega tulaga ese e pei o le fa'atupuina o pito pipi'i i le taimi o le fa'agasologa o le fa'asa'oina o kene, ae o le Cas9 e fa'atupuina ai pito ma'ai (Wang et al., 2021). O lenei meatotino o le Cas12 e fesoasoani i lana tekinolosi fa'apitoa o le fa'atonutonuina o le DNA. I le avea ai ma se porotini e mafai ona iloa ma tipiina ma le sa'o le DNA fa'atatau, e matua'i tele lona agava'a, ma avea ai ma meafaigaluega aoga mo le tele o fa'aoga, e aofia ai le fa'asa'oina o kene (Pickar-Oliver ma Gersbach, 2019).
E tutusa ma isi ituaiga CRISPR, e mafai fo'i e le CRISPR/Cas12 ona fa'ate'aina pe fa'agaoioia ni kene i le TNBC, e fa'atatau i kene e taua tele i lona pathogenesis po'o le tali atu i togafitiga (Yang ma Zhang, 2023). Ina ia fa'ataunu'uina lenei faiga, na atia'e ai se ta'iala RNA (gRNA) e fa'asino i le Cas12 i le kene fa'amoemoeina. O le taimi lava e fusifusia ai le Cas12 i lana fa'amoemoeina, e fa'alauiloa ai ni motusia o manoa e lua i le DNA ma fa'agaoioia ai auala e toe fa'aleleia ai le DNA. I le taimi o le faiga o le toe fa'aleleia, e ono fa'apipi'iina ni nucleotides sese, e o'o atu ai i suiga o kene ma le leiloa o le galuega (Zhang et al., 2021a). E le gata i lea, o se fa'aliliuga fa'aleleia o le enzyme Cas12 (e ta'ua o le dCas12) na fa'aaogaina fo'i e fa'agaoioia ai ni kene. I le tu'ufa'atasia ma se fa'agaoioia o le transcription, e mafai ai ona fa'aosofia nisi kene, ma fa'agaoioia ai. O lenei tekinolosi e tele lona gafatia i le fa'alauiloaina o le fa'agaoioia o kene e taofia ai le tumo (Sultan et al., 2022).
O le Prime editing o se tekinolosi fou ua atiaeina ma e matua sili ona lelei mo le fa'asa'oina o le genome. E mafai ona suia le DNA o se meaola i se auala sa'o (Chen ma Liu, 2023). E ausia le Prime editing e ala i le tu'ufa'atasia o vaega autu e lua: o se enzyme CRISPR/Cas9 ua suia ma le reverse transcriptase. O le matafaioi a le enzyme CRISPR/Cas9 o le fa'atatauina lea o nofoaga tonu i totonu o le genome, ae o le reverse transcriptase e fesoasoani e suia atoatoa le DNA i le nofoaga fa'amoemoe (Hassan et al., 2021). I le faiga o le primer editing, o le la'asaga muamua e aofia ai le fatuina o se ta'iala RNA editing primer (pegRNA) (Standage-Beier et al., 2021). O lo'o i ai le fa'asologa fa'amoemoe ma le RNA template e fetaui ma le nofoaga fa'atonutonu mana'omia i le DNA fa'amoemoe. Ona fa'aofi lea o le pegRNA i totonu o sela fa'amoemoe fa'atasi ai ma se primer editing nuclease (PE2). O le PE2 o se porotini fa'afefiloi e aofia ai se enzyme Cas9, se reverse transcriptase, ma se primer editing adapter (Martín-Alonso et al., 2021). I totonu o le sela, o le pegRNA ma le PE2 complexes e suʻe le DNA patino latou te mananaʻo e suia. O le enzyme Cas9 e tipiina le DNA ma faia ai se template e aofia ai ni manoa e tasi (Choi et al., 2022). O le reverse transcriptase e faʻaaogaina lenei template e saunia ai le DNA mo le faʻasaʻoina. Faʻatasi ai ma le kopiina o le DNA, o faʻatonuga mo le faʻasaʻoina o le RNA template o loʻo aofia ai foʻi. Ma le mea mulimuli, o le manoa DNA fou ua faia e faʻaaogaina o se template e toe faʻaleleia ai le malepe i le DNA, ma iʻu ai i se suiga o le DNA o loʻo i ai le suiga manaʻomia (Ochoa-Sanchez et al., 2021). O auala e faʻasaʻo ai le primer e mafai ona oʻo atu ai i le salalau o suiga i genes. E mafai ona faʻatatau i suiga o le point, faʻaofiina, tapeina, ma e oʻo lava i le suia o genes (Anzalone et al., 2019; Chen ma Liu, 2023). O le prime editing e ofoina atu le tele o faʻamanuiaga nai lo tekinolosi faʻasaʻo genome muamua. E aofia ai le faʻateleina o le saʻo, faʻaitiitia o aʻafiaga e le o faʻamoemoeina, ma le mafai ona faʻasaʻo le DNA e aunoa ma le faʻalagolago i le malepe o le DNA double-strand (Anzalone et al., 2020).
O le tekinolosi CRISPR/Cas9 na muai atiaeina e puipuia ai siama mai le fesiitaiga o le plasmid ma le pipisi o le phage ma mulimuli ane toe faʻaaogaina o se meafaigaluega lelei e faʻatatau i le DNA e faʻavae i luga o le RNA mo le faʻasaʻoina o le genome (Jiang ma Doudna, 2017). E le gata i lea, o le faiga CRISPR/Cas9 ua lipotia mai o loʻo i ai i le 50% ma le 87% o genomes o siama ma archaeal, i le faasologa (Ishino et al., 2018). O le CRISPR/Cas9 o se meafaigaluega talafeagai mo le tapeina, faʻaofiina ma le faʻasaʻoina o soʻo se faʻasologa o kenera e le masani ai e faʻaaoga ai auala in vivo ma in vitro (Sabit et al., 2021). E le gata i lea, ua faʻaalia le CRISPR/Cas9 o se vaega o le adaptive immune system ona o lona faʻapitoa mo kenera faʻatatau e fiafia i ai (Chen ma Zhang, 2018).
O le CRISPR/Cas9 e aofia ai le Cas9 ma le tasi le taʻiala RNA (sgRNA). O le Cas9 o se endonuclease e aofia ai le tele o vaega o porotini. E le gata i lea, o le Cas9 e iai ona uiga tulaga ese i le fausaga ma le fausaga (Pacesa et al., 2022) aua e aofia ai lobes e lua: recognition (REC) ma le nuclease (NUC). O le lobe REC e vaevaeina atili i ni vaega se tolu: REC1, REC2, ma bridge helices (Cromwell et al., 2018). O le NUC e aofia ai lobes e tolu, o le RuvC (RuvC I, RuvC II, RuvC III), HNH ma le protospacer adjacent motif (PAM) interaction domain (Ata 1) (Song et al., 2016). O le sgRNA e aofia ai vaega e lua, e aofia ai le CRISPR RNA (crRNA) ma le transcoding small RNA (tracer RNA) (Ata 1). E feso'ota'i e le sgRNA le porotini Cas9 i connexins e fausia ai se active complex, e ta'ua fo'i o le effector complex (Richter et al., 2012). O le crRNA o se 18–20 nucleotide base peage e taua tele i le iloaina o fa'asologa o le DNA fa'amoemoe. E le gata i lea, e fa'atasi le crRNA ma le DNA fa'amoemoe, ma e galue le tracrRNA o se scaffold mo le Cas9 nuclease e fusifusia ai le DNA fa'amoemoe (Manghwar et al., 2019). I le isi itu, o le fa'asologa o le PAM e 3 nucleotides, lea e fa'amaonia, fa'amaoti ma fa'atonutonuina ai le fusifusia o le effector complex i le DNA. O le Cas9 protein complex subunits RuvC ma le HNH e iai le catalytic activity (Richter et al., 2012; Asmamaw ma Zawdie, 2021). O le HNH nuclease domain o le Cas9 subunit e tipiina le DNA strand e feso'ota'i ma le crRNA. E tipiina e le RuvC nuclease domain isi manoa o le DNA ma fa'atupuina ni motusia o manoa e lua (DSB), a mae'a lea ona fa'agaoioia lea o ni auala se lua e toe fa'aleleia ai le motusia o le DNA (Jiang ma Doudna, 2017) (Ata 1).
Ata 1. Aotelega o le CRISPR/Cas9 (A). Vaega o le faiga CRISPR/Cas9: (i). O le Cas9 endonuclease e nafa ma le tipiina o le faasologa o le DNA e faatatau i ai, (ii) o se taiala e tasi (sg) RNA e mafua mai i le tuufaatasia o le crRNA ma le tra-crRNA chimeras. (lua). O le Cas9 e aofia ai ni vaega se tele e pei o le Rec I, Rec II, NUC lobe (HNH ma le Ruv C o vaega laiti) ma le PAM interaction domain (C) faatasi ai ma galuega faatino talafeagai. O le CRISPR/Cas9 protein complex e vaeluaina faasologa o le DNA i ni foliga e le o ni mea faaopoopo ma ni foliga faaopoopo (D). E faasa'o e le CRISPR/Cas9 le genome i ni vaega se tolu: iloa, tipi ma toe faaleleia. O le sg-RNA ua mamanuina e taiala ai le Cas9 ma iloa le faasologa e manaomia e ala i le vaega faaopoopo crRNA. E iloa e le Cas9 le faasologa o le PAM i le 5′-NGG-3′ ma fa'a'asu le DNA, ma fausia ai se DNA-RNA hybrid ma fa'agaoioia ai le cleavage. O le vaega HNH o Cas9 e tipiina le manoa fa'aopoopo, ae o le vaega RuvC e tipiina le manoa e le fa'aopoopo. E toe fa'aleleia e le CRISPR/Cas9 le dsDNA e ala i le motusia i ni auala se lua: non-homologous end joining (NHEJ) ma le homology-directed repair (HDR). E toe fa'aleleia e le NHEJ le DNA fa'alua-manogi pe a leai se DNA homologous mai fafo e ala i se fa'agasologa enzymatic, o se faiga e faigofie ona sese e mafai ona fa'aofi pe aveese ai fa'asologa fa'afuase'i o le DNA. E matua'i fa'apitoa lava le HDR ma e mana'omia ai fa'ata'ita'iga DNA homologous.
O auala toe faaleleia e ala i le CRISPR/Cas9 e aofia ai le non-homologous end joining (NHEJ) ma le homology-directed repair (HDR). O le NHEJ o se auala e faigofie ona sese ona e aofia ai le fa'aofiina po'o le tapeina ma e le mana'omia ai se mamanu i le taimi o le faiga toe faaleleia. E fa'aaogaina ni nucleotides fa'afuase'i e fa'atupu ai ni porotini masani (Abbasi et al., 2021). O lenei faiga toe faaleleia e aofia ai ni vaega fa'apitoa e fa e pei o le KU complex, le cross-complementing protein complex type 4 (XRCC-4), le DNA end processing enzyme, ma le protein kinase DNA-PKcs (Abbasi et al., 2021). O le porotini KU complex e lua ona vaega, o le Ku 70 ma le Ku 80, ma e taua tele lona sao i le faiga o le NHEJ, auā o le faiga o le toe faaleleia e amataina e ala i le fusifusia o vaega e lua (Ku 70 ma le Ku 80) i pito pupuu pe toetoe lava a pupuu o le DNA fa'amoemoeina (Abbasi et al., 2021), e avea o se fausaga e fa'afaigaluega ai isi mea e feso'ota'i ma le NHEJ i le nofoaga o manu'a (Yang et al., 2020). O le XRCC-4 ma le DNA ligase e aofia ai le 334 ma le 911 amino acids, i le faasologa lava lea, ma o le XRCC4-DNA ligase IV complex e fa'aosofia ai le fusifusia o pito o le DNA (Chatterjee et al., 2015). O le enzyme o le DNA end processing, e ta'ua fo'i o le polynucleotide kinase 3′-phosphate, o se enzyme o le DNA end processing. E mafai ona aveese le vaega 3′P i le DNA ma fa'aphosphorylate le vaega 5′OH i le taimi o le toe faaleleia o le DSB. E aofia ai fo'i le toe fa'aleleia o le single-strand breaks (SSBs) e fa'aaoga ai le auala toe fa'aleleia o le SSB (Chatterjee et al., 2015). O le Protein kinase DNA-PKcs o se DNA-dependent protein kinase e aofia ai se vaega catalytic o le PIKKs (phosphatidylinositol 3-kinase-related kinases) ma le ataxia telangiectasia mutated (ATM) family, fa'apea fo'i ma le ATM ma le Rad3-related ATRs. strand breaks (DSBs) ma single-strand breaks (Yue et al., 2020; Peng et al., 2016).
O le HDR o se auala e sili atu ona sa'o ma talafeagai mo le toe faaleleia ona o le kopiina o faamatalaga e faaaoga ai le foliga atoa o le homologous DNA duplex, e ui lava e manaomia ai le i ai o chromatids tuafafine. E tupu lenei mea i le taimi o le S/G2 phase o le mammalian cell cycle. E tupu tele le HDR i ituaiga o mea fefete, ae e taua tele le NHEJ i mammals (Burma et al., 2006; Abbasi et al., 2021). O le auala atoa mo le toe faaleleia o loo faaalia i le Ata 1.
Talu ai ona mafua le TNBC i faʻaletonu tau kenera ma epigenetic, o le faʻasaʻoina o faʻaletonu tau kenera/epigenomic e faʻaaoga ai le CRISPR/Cas9 atonu o se auala talafeagai mo togafitiga (Chen et al., 2019). E le gata i lea, o nisi o mea e aofia ai i le faʻatonutonuina o le faʻaliliuina o sela e ono faʻaalia ai uiga tulaga ese o sela o le kanesa, ma faʻaalia ai o le faʻatonutonuina o le faʻaliliuina atonu o se auala sili ona lelei mo togafitiga o le kanesa (Drost et al., 2017). O le faʻaaogaina o nei foliga molecular o tumo, e pei o faʻaletonu tau kenera, epigenetic ma faʻaletonu tau tusitusiga, mo le atinaʻeina o vailaʻau e mafai ona faʻaleleia atili ai taunuʻuga faʻapitoa ma faʻaitiitia ai tau o suʻesuʻega. O le CRISPR o se meafaigaluega e mafai ona faʻasaʻoina ai kenera e le gata ina mafai ona iloa ma faʻailoa ai sini genomic e mafua ai le kanesa, ae mafai foi ona faʻaaogaina e faʻasaʻo, taofia, ma suia epigenetically oncogenes i sela o le tagata (Table 1) (Ahmed et al., 2021). E tele suʻesuʻega CRISPR ua faia e suʻe ai kenera e fesoʻotaʻi ma mea e taofia ai le tumo, oncogenes, ma le teteʻe atu i vailaʻau. O le faʻaaogaina o le CRISPR/Cas9 e faʻasaʻo ai le tele o TNBC oncogenes o loʻo faʻaalia i le Ata 2.
Ata 2. Fa'asa'oina o kene o le tele o TNBC oncogenes e fa'aaoga ai le CRISPR/Cas9 ma i'u ai i le fa'aitiitia o le tuputupu a'e o le tumo ma le metastasis. O nei oncogenes e aofia ai le CDK7, NAT1, UBR5, YTHDF2, ITGA9, CXCR4 ma le CXCR7, Crypto1, ROR1 ma le ST8SIA, ia e a'afia i le tutupu mai ma le metastasis o le TNBC.
O le femalagaiga o sela o le kanesa, osofaʻiga, ma le suiga o le epithelial-mesenchymal (EMT) e fesoʻotaʻi ma le ITGA9. O suʻesuʻega ua mavae ua faʻaalia ai o le ITGA9 o se tagata autu i le auala o le Notch ma e iai sona sao taua i le metastasis o le rhabdomyosarcoma (Molist et al., 2020). E le gata i lea, na maua ai le fesoʻotaʻiga vavalalata o le ITGA9 ma le vaʻaiga o le maʻi i le tele o ituaiga o tumo, e aofia ai le kanesa o le susu (Wang Z. et al., 2019). E le gata i lea, o le auʻiliʻiliga o le bioinformatics o le ITGA9 na faʻaalia ai o lona faʻaalia i le TNBC e matua maualuga atu nai lo isi ituaiga o kanesa o le susu. O le maualuga o le ITGA9 e fesoʻotaʻi ma le metastasis o le tumo ma le toe foʻi mai i maʻi TNBC. O le faʻaumatia o le ITGA9 e le CRISPR/Cas9 na mafua ai ona iai ni meatotino e pei o le kanesa o le stem cell (CSC), angiogenesis o le tumo, tuputupu aʻe o le tumo, ma faʻaitiitia le metastasis e ala i le faʻalauiloaina o le faʻaleagaina o le β-catenin i le TNBC (Wang Z. et al., 2019).
O le Crypto-1 o se sui o le aiga TGF-β ma e taua tele mo le amataga o le embryogenesis, tausiga o le stem cell, ma le metastasis o le kanesa (Ishii et al., 2021). E ta'ua fo'i o le Tdgf-1, o se porotini fa'ailoilo oncogenic GPI-anchored e a'afia i le fa'atonutonuina o le fausiaina o le primitive streak, mesoderm ma le endoderm, fa'apea fo'i ma le fa'atuina o le le tutusa agavale/taumatau i le atina'eina o totoga o le tino i le taimi o le embryogenesis (Zhang et al., 2021b). E le gata i lea, ua fa'aalia o lo'o a'afia le Cripto-1 i le epithelial-mesenchymal transition (EMT) o se fa'ailoga o le stem cell (Zhang et al., 2021b). E le gata i lea, e taua tele le EMT e le gata mo le tele o faiga e pei o le atina'eina o le embryonic, fibrosis ma le fa'amalologa o manu'a, ae fa'apea fo'i mo le osofa'iga o le kanesa ma le metastasis. E le gata i lea, ua fa'aalia o lo'o fegalegaleai le Cripto-1 ma Notch receptors e fa ma fa'aleleia atili ai lo latou maturation pe a uma le fa'aliliuga (Brandstadter ma Maillard, 2019). Ua iloa o le auala fa'ailoilo a le Notch e a'afia i le tausiga o sela o le kanesa o le susu o le tagata. Ua fa'aalia e su'esu'ega o le CRISPR/Cas9-mediated knockout o le Crypto-1 e taofia ai le tuputupu a'e o le kanesa ma le metastasis. O le mea lea, e ono avea le Crypto-1 ma se sini taua mo togafitiga a le TNBC (Castro et al., 2015).
O le porotini XCL12 ma lona chemokine receptor CXC (CXCR4 ma le CXCR7) e tele ona matafaioi i le faʻateleina o sela o le kanesa, tuputupu aʻe, femalagaaʻi ma osofaʻiga (Wu et al., 2015). O nei chemoreceptors ua fesoʻotaʻi ma le atinaʻeina o le TNBC e ala i auala faʻailoilo eseese i faʻataʻitaʻiga in vivo ma in vitro (Wu et al., 2015). E le gata i lea, o le faʻagaoioia o le CXCR4 ma le CXCR7 e fesoʻotaʻi ma le tele o le vaivai i le metastasis ma le leaga o le vaʻaiga i le TNBC (Karn et al., 2022). O le mea lea, o le faʻaumatia o le CXCR4 ma le CXCR7 e ono avea ma genes faʻatatau i vailaʻau mo le togafitia o le kanesa o le susu, e aofia ai le TNBC. O le suʻesuʻega a Yang et al. Yang et al (2019) na faʻaaogaina ai le CRISPR/Cas9 e faʻaumatia ai genes CXCR4 ma le CXCR7 ma maua ai o le faʻateleina o le TNBC, tuputupu aʻe, femalagaaʻi ma osofaʻiga sa matua taofia lava (Yang et al., 2019).
O le faʻateleina o le maualuga o le miR-3662, o se TNBC oncogene, na matauina i totonu o aano o le kanesa o le susu (Yi et al., 2022). Ua faʻaalia le faʻaitiitia o le miR-3662 e taofia ai le tuputupu aʻe o le tumo o le kanesa o le susu ma le metastasis i totonu o le tino ma totonu o le tino (Agarwal ma Gupta, 2021). O le HBP-1 o se mea e taofia malosi ai le faʻailogaina o le Wnt/-catenin ma e foliga mai e nafa ma le tuputupu aʻe o sela TNBC e mafua mai i le miR-3662. Talu ai nei, na maua ai e Yi et al. o le miR-3662-HBP1 axis e faʻatonutonuina ai le auala faʻailogaina o le Wnt/-catenin i sela TNBC (Yi et al., 2022). Ona o lona faʻaalia faʻapitoa i le tumo, o le miR-3662 atonu o se sini faʻapitoa mo le TNBC. O le mea lea, o le faʻaitiitia o le miR-3662 e mafua mai i le CRISPR/Cas9 atonu o se auala sili lea mo le atinaʻeina o vailaʻau fou mo le togafitia o le TNBC.
O le UBR5 o se nucleophosphoprotein e 300 kDa ua fa'ailoa mai o se fa'atonutonu autu o le tumorigenesis, metastasis, ma le tali atu o le puipuiga o le tino i kanesa eseese (Shearer et al., 2015; Fu et al., 2023). Ua lipotia mai o le UBR5 ua matua fa'ateleina i fa'ata'ita'iga TNBC ma fa'aosofia ai le galuega a le ERα e ala i le fa'aosofia o le fa'ateleina e ala i lana gaioiga ubiquitin ligase (Bolt et al., 2015). O su'esu'ega atoa o le exome sequencing o fa'ata'ita'iga autu o le TNBC na fa'aalia ai fo'i le fa'ateleina o le fa'aalia o le UBR5, ma fa'ailoa mai ai lona sao i le atina'eina o le TNBC. E le gata i lea, o le tapeina o le UBR5 e le CRISPR/Cas9 na fa'aalia ai le taofia tele o le metastasis o le TNBC ma le tuputupu a'e i fa'ata'ita'iga o isumu fa'ata'ita'i. E le gata i lea, o le aofia ai o le UBR5 i se fa'ata'ita'iga isumu wild-type na toe fa'afo'isia ai lona galue atoatoa, ae o lenei aafiaga e le'i va'aia i ituaiga mutant ua le fa'agaoioia (Liao et al., 2017). O le leai o le UBR5 e fesoʻotaʻi ma le faʻateleina o le apoptosis, necrosis, ma le taofiofia o le tuputupu aʻe o le tumo i le TNBC ona o le le lelei o le angiogenesis. Ona o le leiloa o le UBR5, ua faʻaitiitia ai le salalau o le tumo i totoga mamao, ma o le UBR5 e mafua ai le EMT e le masani ai e ala i le faʻaitiitia o le faʻaalia o le E-cadherin (Zhang ma Weinberg, 2018). Talu ai nei, na faʻaalia ai o le UBR5 o se mea taua tele i le IFN-γ-induced PDL1 transcription i le TNBC ona o lona leai o se gaioiga o le E3 ubiquitination. O le suʻesuʻega o le RNA transcriptome na faʻaalia ai e ono i ai ni aʻafiaga faʻaletino o le UBR5 i genes e fesoʻotaʻi ma le auala IFN-γ ma faʻalauiloa le PDL1 transactivation e ala i le faʻateleina o le faʻagaoioiga o le protein kinase RNA (PKR) ma ana signal transducers ma activators. transcription 1 (STAT1) ma le interferon regulatory factor 1 (IRF1). Peita'i, o le fa'amamāina fa'atasi o le UBR5 ma le fa'aalia o le PD-L1 e ala i le CRISPR/Cas9 e iai sona aafiaga fa'amalolo e sili atu ona galulue fa'atasi nai lo na'o le poloka, fa'atasi ai ma ni aafiaga loloto i le siosiomaga o le tumo (Wu et al., 2022). O le mea lea, o le CRISPR/Cas9 atonu o se meafaigaluega taua e taofia ai le galuega a le UBR5, ma taofia ai le metastasis o le TNBC ma le tuputupu a'e o le tumo.
O le ROR1 o se porotini transmembrane ituaiga I e faʻaalia i le taimi o le kanesa ma le atinaʻeina o le pepe ma ua faʻailoaina o se porotini oncofetal (Nicholas Borcherding, 2014). O amioga osofaʻi a le tele o kanesa o le tagata e fesoʻotaʻi ma le faʻateleina o le ROR1. Ua maua ni taunuuga lelei mai suʻesuʻega in vivo ma in vitro e aofia ai vailaʻau faʻamalolo e faʻatatau i le ROR1 (Chien et al., 2016). O le maualuga o le ROR1 mRNA i biopsies o le susu ua fesoʻotaʻi foʻi ma tumo malolosi o le susu basal-like (BL) ma lo latou femalagaʻi atu i isi vaega o le tino. E le gata i lea, o le soona faʻaalia o le ROR1 ua faʻailoaina o se faʻailoga mo le atinaʻeina o le TNBC (Chien et al., 2016). Peitaʻi, o le faʻafilemuina o le ROR1 e faʻaaoga ai le CRISPR/Cas9 e taofia ai le tuputupu aʻe o le TNBC ma le metastasis o le a avea ma se fuafuaga lelei.
O le faiga o le sialylation e aofia ai le faaopoopoina o le sialic acid i glycoconjugates, lea e faʻatinoina e sialyltransferases (STs). O le ST8SIA1 e patino i le aiga ST ma e iai sona sao taua i le pathogenesis o faʻamaʻi eseese e pei o le lymphocytic leukemia ma le kanesa colorectal (Chang et al., 2018). O le auiliiliga o le faasologa o le RNA e faaalia ai o le ST8SIA1 e maualuga lona faailoaina i totonu o le aano o le susu o tagata mamaʻi TNBC ma e fesoʻotaʻi lelei ma fesuiaiga i le gene suppressor tumor p53, lea e ono fesoasoani i le pathogenesis o le TNBC (Battula et al., 2017). E le gata i lea, o le ST8SIA1 e aofia ai i le metastasis ma le toe foi mai o le TNBC, ma fautua mai ai o loo iai sona sao taua i le tupu mai ma le atinaeina o le TNBC. I se faataitaiga in vitro o le TNBC, o le faatoilaloina o le ST8SIA1 e le CRIPSR/Cas9 na faaalia ai e taofia ai le tuputupu aʻe ma le metastasis (Battula et al., 2017). O lenei mea e faʻaalia ai o le CRISPR/Cas9 atonu o se meafaigaluega taua mo le taofiofia o le galuega a le ST8SIA1 oncogene i le togafitia o le TNBC.
O le NAT1 o se enzyme metabolic e fa'agaoioia ai le fausiaina o vaila'au xenobiotic vaega II ma e fa'aalia i toetoe lava o aano uma o le tagata. E mafai e le NAT1 ona fa'aogaina le cofactor folate e fa'atatau i le acetyl-CoA (acetyl-CoA) e tusa lava pe leai se substrate amine aromatic (Stepp et al., 2015; Laurieri et al., 2014). Ua fa'aalia i su'esu'ega o le NAT1 e fa'atonutonuina le galuega a le matrix metalloproteinase 9 (MMP9) i fa'ata'ita'iga o sela o le kanesa o le susu ma puipuia mai le reactive oxygen species (ROS) i le taimi o le matelaina o le kulukose (Wang et al., 2018). O le tapeina o le NAT1 ua fa'aalia e taofia ai le pyruvate dehydrogenase complex, e o'o atu ai i le fa'aletonu o le mitochondrial (Wang L. et al., 2019). E le gata i lea, o isi lipoti eseese ua fa'aalia ai o le taofia o le NAT1 e fa'aaoga ai molela'au laiti ma le fa'afilemuina o le siRNA e mafai ona fa'aitiitia ai le osofa'iga ma le fa'ateleina o sela o le kanesa o le susu (Stepp et al., 2018). Talu ai nei, na faʻaaogaina ai le CRISPR/Cas9 e taofia ai le NAT1 i le laina o sela o le kanesa o le susu MDA-MB-231, ma aʻafia ai le metabolism o sela e faʻatatau i lona tulaga faʻaalia. O lenei suʻesuʻega na faʻaalia ai foʻi o le NAT-1 e taua tele mo le alualu i luma ma le metastasis o le TNBC (Carlisle et al., 2020).
O le fa'aliliuga fa'amaopoopo o oncogenes e fa'atonutonuina e super enhancers, transcription factors ma cofactors (Hnisz et al., 2015). E le gata i lea, o se vaega o cyclin-dependent kinases (CDKs), e pei o le CDK7, CDK8, CDK9, CDK12, ma le CDK13, e mana'omia mo le fa'atonutonuina o le transcriptional. O nisi o ia mea, o le CDK7 e a'afia i le phosphorylation o le RNA polymerase II, lea e matua taua tele mo le amataina ma le fa'alauteleina o le oncogene transcription i le pathogenesis o le TNBC. I se su'esu'ega taua, o le tapeina o le CDK7 e le CRISPR/Cas9 na taofia ai le TNBC, ma fa'ailoa mai ai o le pathogenesis o le TNBC e fa'alagolago i le CDK7 (Wang Y. et al., 2015).
Ua faʻaalia e suʻesuʻega e mafai e fesuiaʻiga i le MYC ma le RBP (RNA binding protein) ona oʻo atu ai i le apoptosis, ae o fesuiaʻiga o kenera e tasi i le MYC poʻo le RBP e le afaina ai le tuputupu aʻe o sela o le kanesa (Einstein et al., 2021). E silia ma le 1000 RBP i le genome o le tagata ua suʻesuʻeina e faʻaaoga ai se faletusi faʻavae i luga o le CRISPR/Cas9. I totonu o na mea, e 57 RBP na maua e taua tele mo le tuputupu aʻe o sela o le kanesa ma le maualuga o le MYC (Wheeler et al., 2020). E le gata i lea, e taua le YTHDF2 mo le faatumauina o le tuputupu aʻe o sela TNBC ma faʻaitiitia ai le aofaʻi o methylated transcripts i le taimi o le maualuga o le transcription ma le faʻaliliuga i sela o le kanesa ma le maualuga o le MYC expression. E le gata i lea, e le taua le YTHDF2 mo sela o le kanesa, lea e itiiti le faʻalagolago i le maualuga o le MYC e faʻaumiumi ai le ola o tagata mamaʻi TNBC (Einstein et al., 2021), ma faʻailoa mai ai atonu o se sini faʻapitoa mo vailaʻau e mafai ona faʻatoʻilaloina le TNBC.
E tusa ma le 1% o le aofaʻi atoa o le genome o le tagata e maua i porotini o tamatamailima zinc (ZNFs). Ua faʻaalia e suʻesuʻega e mafai e le ZNF ona faʻatonutonu le tuputupu aʻe o sela i kanesa eseese, e pei o le kanesa o le ate, kanesa o le susu ma le kanesa o le colorectal (Zhang W. et al., 2021; Li et al., 2017). O faletusi na gaosia e le CRISPR knockout ua faʻaaogaina e suʻesuʻe ai le tele o genes o le tumor suppressor (TSGs) i sela o le kanesa o le susu (Shalem et al., 2014). Talu mai lena taimi, o se suʻesuʻega transcriptomic o sela o le kanesa o le susu na tapeina e le CRISPR/Cas9 ZNF319 ua faʻaalia ai o le ZNF319 o se gene o le tumor suppressor e faʻaitiitia ai le tuputupu aʻe o le kanesa o le susu ma o lea e aʻafia ai i le tele o auala faʻailoilo ma isi galuega faʻaola (Wang L. et al., 2022).
O le Ferroptosis o se ituaiga o le oti fa'apolokalameina o sela e fa'alagolago i le i ai o le u'amea. Ua iloa o le atina'eina o le ferroptosis e a'afia i le i ai o lipid peroxides. E le gata i lea, ua lipotia mai o le PKCβII e fa'aalia ai le vave o le lipid peroxidation, ma o le fa'ateleina o le lipid peroxidation e feso'ota'i ma le ferroptosis. O le su'esu'eina o se faletusi o CRISPR/Cas9-mediated kinase inhibitors na fa'aalia ai o le PKCβII e a'afia i le fa'agasologa o le lipid peroxidation, lea e taua tele mo le ferroptosis i sela MDA-MB-231 (Zhang et al., 2022). O le mea lea, o lo'o fa'ailoa mai ai o le fa'aumatia o le PKCβII e le CRISPR/Cas9 atonu o se fa'amoemoega autu mo le togafitia o fa'ama'i e feso'ota'i ma le ferroptosis (Zhang et al., 2022).
E talitonuina o le tete'e atu i vaila'au e mafua ai le tusa ma le 90% o maliu i tagata mama'i kanesa ma o se tasi lea o lu'itau tetele i togafitiga o le kanesa (Bukowski et al., 2020). O fa'ai'uga e fa'aalia ai o le tele o kenera e feso'ota'i ma le alu ese atu o vaila'au, toe fa'aleleia o le DNA, apoptosis ma auala eseese o fa'ailoilo o sela e feso'ota'i ma le tete'e atu i vaila'au (Haider et al., 2020). I totonu o na mea, o le tele o kenera ua fa'atatauina e meafaigaluega CRISPR/Cas9 ma ua fa'aalia ai ni taunuuga lelei i le fa'aitiitia o le tete'e atu i vaila'au ma le fa'ateleina o le aoga o togafitiga fa'asaga i le kanesa (Vaghari-Tabari et al., 2022). E le gata i lea, o faletusi maualuga o su'esu'ega o kenera CRISPR/Cas9 ua a'afia i le suia o le galuega a kenera e ono tete'e atu i vaila'au (Shalem et al., 2015). Ina ia iloa ai ni kene tete'e i le paclitaxel, na fa'aaogaina ai le fa'asologa o le RNA fa'atasi ai ma le su'esu'ega o le faletusi sgRNA lautele e iloa ai ni kene e valu, e aofia ai le histone deacetylase 9 (HDAC9), e feso'ota'i ma le tete'e i vaila'au i gasegase e toe maua i le TNBC (B et al., 2020). I se isi su'esu'ega, na matauina ai le fa'ateleina o le fa'aalia o le diserine/threonine ma le tyrosine protein kinase (DSTYK) i le taimi na ola ai gasegase TNBC na togafitia i vaila'au fa'asaga i le kanesa. E le gata i lea, o le fa'aitiitia o le DSTYK e mafua mai i le CRISPR/Cas9 na fa'ateleina ai le apoptosis o sela kanesa e tete'e i vaila'au i totonu o vitro (sela SUM102PT ma sela MDA-MB-468) ma se fa'ata'ita'iga TNBC in vivo (Ogbu et al., 2021).
E ui o le TNBC e iai le fa'agaoioiga e le masani ai o le auala MAPK, ae o le a'afiaga fa'aklinikal o togafitiga fa'atatau i le MEK e le lelei. O se su'esu'ega o le faletusi genomic a le CRISPR/Cas9 na fa'aalia ai o le taofia o le PSMG2 (proteome assembly chaperone 2) e fa'aalia ai le lagona o sela TNBC BT549 ma le MB468 i le MEK inhibitor AZD6244. O le fa'aitiitia o le CRISPR/Cas9 o le PSMG2 na suia ai le galuega masani a le proteasome, ma o'o atu ai i le autophagy-mediated disassembly o le PDPK1, ma fa'aleleia atili ai sela o le tumo i fa'ata'ita'iga o isumu TNBC na fa'aosofia e le AZD6244 (MEK inhibitor) ma le MG132 (proteasome inhibitor). O le mea lea, o le proteasome ma le MAP kinase (MEK) inhibitors e mafai ona fa'atinoina fa'atasi e fa'aitiitia ai le fa'ateleina o sela o le tumo (Wang X. et al., 2022).
Ua fa'aaogaina fo'i le CRISPR/Cas9 e su'esu'e ai le leiloa o le galuega a kenera e mafua ai ona tete'e atu i le TNBC (Shu et al., 2020). Na fa'amatalaina e Ge et al le faiga o le tete'e atu o sela o le kanesa i vaila'au na togafitia i le JQ1, o se BET bromodomain inhibitor (BBDI), i le TNBC. I le fa'aaogaina o le CRISPR/Cas9, na latou iloa ai o le tapeina o le kenera rb1 na mafua ai ona tete'e le TNBC i le vaila'au fa'asaga i le kanesa JQ1. O le mea lea, e taua tele le galuega a le rb1 i le tali atu i vaila'au JQ1 i le TNBC. Na latou lipotia fo'i o le paclitaxel o se CDK4/6 kinase/microtubule inhibitor, ma o lona tu'ufa'atasia ma BBDIs e pei o le JQ1 e ono maua ai ni tali fa'amalolo lelei i le TNBC e tete'e atu i vaila'au (Ge et al., 2020).
Ua lipotia mai o le vaaiga fa'aliliu o le RNA umi e le fa'ailogaina (lncRNA) e mafua ai le tete'e atu i togafitiga neoadjuvant i le TNBC. O lenei su'esu'ega e fa'aalia ai e lima tusitusiga eseese o le MALAT1 lncRNA e maualuga lona fa'aalia i le TNBC. E le gata i lea, o le tapeina o le MALAT1 e ala i le CRISPR/Cas9 na fa'ateleina ai le maaleale o sela TNBC BT-549 i le paclitaxel ma le doxorubicin, ma fa'ailoa mai ai se matafaioi e ono iai mo le tete'e atu i le MALAT1 i le TNBC (Shaath et al., 2021).
E eseese suiga i le BRCA1 (BRCA1m) ma o lea e faigata ai ona iloa. O le taula’i atu i le PARP1 (poly(ADP-ribose) polymerase), o le pa’aga fa’aleaga fa’apitoa o le BRCA1, e ono fa’ateleina ai le chemosensitivity o vaila’au TNBC. I le fa’aaogaina o le CRISPR/Cas9, o le tapeina o le PARP1 na fa’ateleina ai le maaleale o vaila’au fa’asaga i le kanesa e pei o le doxorubicin, gemcitabine ma le docetaxel i sela TNBC mutant mBRCA1, ma fa’ailoa mai ai o lo’o a’afia fo’i le PARP1 i le tete’e atu i vaila’au i le TNBC (Vaghari-Tabari et al., 2022). . O suiga i genes o lo’o taofia ai le kanesa o le BRCA1 po’o le BRCA2 ua iloa e fa’ateleina ai le ono maua o le kanesa o le susu i tagata. O le togafitia o nei gasegase e mana’omia ai le fa’aaogaina o PARP inhibitors. E le gata i lea, ua faʻaalia ai o le faʻaumatia o le nucleotide salvage factor DNPH1 e faʻaaoga ai le CRISPR/Cas9 e mafai ona aveese ai le nucleotide oona 5-hydroxymethyldeoxyuridine (hmdU) monophosphate, ma faʻaleleia atili ai le tali atu o sela e le lava le BRCA i le maaleale i PARP inhibitors (Fugger). et al., 2021). O le mea lea, o le CRISPR/Cas9 ma le PARP1 inhibitors e ono avea ma se fuafuaga taua mo togafitiga mo le TNBC.
O le penetrant glycoprotein (P-gp) gene o se gene e tete'e atu i vaila'au e tele e masani ona fa'ateleina i le tusa ma le 41% o TNBC uma (Sun et al., 2020). O le tafe mai o vaila'au e mafua mai i le P-gp ua fa'ailoa mai o se fa'atonutonu autu o le tete'e atu i vaila'au i le kanesa o le susu. Ua fa'aalia e le P-gp inhibitors le fa'ateleina o le maaleale i vaila'au e tete'e atu i le kanesa i le kanesa o le susu (Famta et al., 2021). O le mea lea, o le CRISPR/Cas9-mediated ablation po'o le taofiofia o le P-gp ma le P-gp inhibitors atonu o ni metotia taua tele e fa'ato'ilalo ai le tete'e atu i vaila'au i le TNBC.
Ua iloa le ATP-binding cassette transporter G2 (ABCG2) e mafua ai le tete'e atu i vaila'au i le TNBC (Palasuberniam et al., 2015), e ui lava e leai ni lipoti i le taimi nei e uiga i le sootaga i le va o le CRISPR/Cas9 ma le ABCG2 fa'aitiitia ma le fa'agataina o le tumor suppressor gene. E mafai e le PTEN ona fa'aleleia atili le fa'agaoioiga o le ABCG2 (Palasuberniam et al., 2015), (Deepak Singh et al., 2021). O le mea lea, o le fa'aaogaina o le CRISP/Ca9 e aveese ai le ABCG2 ma le tu'ufa'atasia ma se ABCG2 inhibitor atonu o se togafitiga talafeagai e fa'ato'ilalo ai le tete'e atu i vaila'au i le TNBC. O lo'o ta'ua i le Laulau 2 le CRISPR/Cas9 e fa'atatau i genes tete'e uma.
Laulau 2. O le CRISPR/Cas9 e taula'i i le tele o genes e tete'e atu i le TNBC e fa'agaoioi ai sela i vaila'au e tete'e ai i le kanesa.
O faletusi CRISPR/Cas9 o ni meafaigaluega e mafai ona fa'aaogaina mo le su'esu'eina o fesuia'iga o kene e feso'ota'i ma le pathogenesis o le kanesa (Chan et al., 2022). O lenei metotia su'esu'e e aofia ai la'asaga e fa e pei o le (a) fausiaina o faletusi, (b) lentiviral transduction, (c) phenotypic screening, ma le (d) su'esu'ega o kene fa'atatau. E ui o le TNBC e iai le fa'agaoioiga e le masani ai o le auala MAPK, o le va'aiga fa'apitoa o le togafitiga fa'atatau MEK mo gasegase TNBC o lo'o iai fesuia'iga i kene e taofia ai le tumo e pei o le PTEN, RB1, ma le TP53 e matua leaga lava.
E le gata i lea, o se su'esu'ega o kene e fa'aaoga ai le CRISPR/Cas9 na fa'ata'ita'iina ai le mole sili ona malosi ma filifili, o le dehydrocatrol, lea e tele i mea e maua mai fugāla'au ma laulaau Kuatemala, ina ia malamalama ai i le a'afiaga o le dehydrocatrol i le MDA-MB-231. Faiga o le cytotoxicity o sela filifili. Uiga o le mesenchymal stemness o TNBC subtypes. O lenei su'esu'ega fa'avae i le CRISPR/Cas9 na fa'aalia ai fo'i o le HSD17B11, o se kene e fa'ailoa ai le 17β-hydroxysteroid dehydrogenase ituaiga 11, e maualuga lona fa'aalia i sela MDA-MB-231 ma e mafua ai le dehydrofalcarinol fa'apitoa mo sela MDA-MB-231 (Grant et. al., 2020). O le mea lea, o lo'o fa'ailoa mai ai o le su'esu'ega genomic CRISPR/Cas9 e tele lona gafatia i le fa'ailoaina o faiga o lo'o i lalo o meatotino e tete'e ai i le kanesa o vaila'au fa'anatura.
E le gata i lea, o le vaivai o le TNBC i le kanesa na suʻesuʻeina e faʻaaoga ai se suʻega CRISPR/Cas9 e le faʻaituau i le genome lautele, lea na faʻaalia ai se sootaga i le va o auala oncogenic ma tumor suppressor. O vaega autu o auala mTOR ma Hippo ua lipotia mai e iai ni matafaioi taua i le faʻatonutonuina o le tumo i le TNBC. E le gata i lea, o suʻesuʻega ua faʻaalia ai o le taofiofia faʻafomaʻi o le mTORC1/2 ma le YAP oncoprotein e taofia lelei ai le pathogenicity o le TNBC e faʻaaoga ai se faʻataʻitaʻiga synergy drug-matrix in vitro ma xenografts e maua mai i tagata mamaʻi in vivo. E le gata i lea, o le taofia o le mTORC1/2 e faʻaosofia e le Torin-1 e faʻaleleia atili ai le macropinocytosis, ae o le taofia o le YAP e mafua mai i le verteporfin e oʻo atu ai i le oti o le sela TNBC. A tuʻufaʻatasia, o nei taunuuga e faʻamamafaina ai le malosi ma le malosi o le suʻega CRISPR i le genome lautele e faʻailoa ai togafitiga fou ma aoga mo le TNBC (Dai et al., 2021).
O le le pulea lelei o le puipuiga o le tino o se mea taua i le tuputupu aʻe o le kanesa. O sela o le kanesa e ʻalo ese mai le puipuiga o le tino e ala i le aloese mai auala puipuia, e aofia ai le faʻalavelave i le gaioiga a sela puipuia i le siosiomaga o le kanesa ma faʻaleagaina ai le puipuiga o le tino. O le mea lea, o le atinaʻeina o se puipuiga lelei e ono avea ma se auala taua i le tau faasaga i tumo. O le faʻaaogaina o le suiga o kene e faʻavae i luga o le CRISPR/Cas9 e foia ai le tele o mataupu e fesoʻotaʻi ma le le lelei o le puipuiga o le tino mai itu eseese. Ua faʻaaogaina le CRISPR/Cas9 e faʻaleleia atili ai le puipuiga o le tino mai le kanesa o le susu e ala i auala nei (Ata 3).
Ata 3. O le togafitiga fa'ama'i CRISPR/Cas9 e fa'atatau i sela TNBC. O le leiloa o le CDK5 ma le fa'aitiitia o le PDL1 ma le CD155 e fa'amalosia ai le puipuiga o le tino. E fa'apena fo'i, o le leiloa o le A2AR ma le fa'aitiitia o TAAs e pei o le HER2, mucin 1 ma le TEM8 na fa'ateleina ai le lelei o sela CAR-T i le fasiotia o sela kanesa. O le su'esu'ega o sela T e fa'amalosia e le CRISPR/Cas9 ua fa'aalia ai o le fa'alavelaveina o le p38 kinase e fa'aleleia atili ai le gaioiga a le sela T e tete'e ai i le kanesa. O sela T ua suia e le CRISPR/Cas9 e fa'ateleina ai le fa'aalia o le TCR (T cell receptor), ma i'u ai ina iai le gaioiga a sela T e tete'e ai i le kanesa.
O le sini autū o le togafitiga fa'ama'i o le puipuiga o le tino o le fa'aosofia lea o le puipuiga o le tino e osofa'ia sela o le kanesa. O le soona fa'ateleina o polotini siaki o le puipuiga o le tino e masani ona taofia ai tali atu o le tino ae atonu e fesoasoani i kanesa e 'alofia ai (Topalian et al., 2015). O nei polotini e taofia ai tali atu o le puipuiga o le tino e ala i le fusifusia i mea e maua mai i luga o sela o le puipuiga o le tino. O le tele o polotini siaki (e pei o le CD155 ma le PD-L1) e fa'atatau i le mea e maua mai le PD-1 i luga o sela o le puipuiga o le tino ma e fa'aalia i le kanesa o le susu, aemaise lava le TNBC (Li Y.-C. et al., 2020). O le fa'aitiitia o le PD-L1 po'o lana mea e maua mai le CRISPR/Cas9 e mafai ona fa'aosofia ai le puipuiga o le tino e osofa'ia tumo o le TNBC (Yahata et al., 2019). E le gata i lea, o le fa'aitiitia o le fa'aalia o le PD-L1 e ala i le tapeina o le CDK5 e ala i le CRISPR/Cas9 ua fa'aalia e taofia ai le tuputupu a'e o le tumo i totonu o le vitro ma totonu o le tino (Deng et al., 2020). O le taofiofia o le tuputupu aʻe i faʻataʻitaʻiga in vitro ma in vivo o le kanesa o le susu ua fautua mai ai o le faʻaitiitia o le CD155 e faʻatautaia e le shRNA atonu e iai sona aafiaga faʻamalolo i le kanesa o le susu (Gao et al., 2018).
E fa'aalia e sela CAR T ia CAR e iloa ai antigens e feso'ota'i ma le tumo (TAAs) ma e mafai ona fa'aogaina le fa'aitiitia o polotini siaki e fa'aleleia atili ai a latou gaioiga (Li C. et al., 2020). E tele ni fa'amoemoega e ono mafai ona fa'aaogaina mo togafitiga o sela CAR T i le kanesa o le susu, e aofia ai le tele o TAA e pei o le HER2, mucin1, ma le TEM8 (Bajgain et al., 2018). E iai fa'amaoniga e sili atu le aoga o sela CAR T e fa'atatau i le mesothelin (e tele naua le fa'aalia i sela TNBC BT-459) e fa'asaga i le kanesa pe a fa'aumatia le PD-1 e fa'aaoga ai le CRISPR/Cas9 (Hu et al., 2019). Peita'i, o le vavae'eseina o sela T mai gasegase ona toe fa'asa'oina lea ex vivo o se faiga e tele ai galuega ma le taimi. E ui lava e mafai e sela T lautele ona fa'aitiitia mana'oga mo le vavae'eseina, ae tatau ona aveese sela T foa'i e fa'aalia ai le human leukocyte antigen (HLA) vasega I ma le T cell receptor (TCR) e puipuia ai fa'aletonu o le graft-versus-host (Ren et al., 2017). , 2017a). Fa'aaogaina le CRISPR/Cas9, e mafai e le HDR ona fa'aumatia fa'atasi le TCR ma le HLA ma fa'aumatia le gene o lo'o fa'ailoa mai ai le CAR. Ua fa'aalia e su'esu'ega e mafai ona fa'aaogaina le CRISPR/Cas9 e fa'aofi ai le anti-CD19 CARs i totonu o le TCR locus, ma maua ai ma le lelei le CARs e aunoa ma le fa'aitiitia o sela T (Dimitri et al., 2022). Ua atia'e tekinolosi Multiplex e maua ai sela allogeneic CAR T e ala i le fa'aumatia fa'atasi o le TCR, beta-2-microglobulin (B2M), HLA-I subunit ma isi porotini e pei o le PD-1 ma le CTLA-4, lea atonu e sili atu ona iai meatotino e tete'e ai i le kanesa. fa'asaga i le TNBC (Eyquem et al., 2017; Liu et al., 2017; Ren et al., 2017b; Dimitri et al., 2022).
O le fa'aaogaina o le CRISPR/Cas9 e mafai ona fa'aleleia atili ai le aoga o sela CAR-T. Ua iloa le iai o meatotino e taofia ai le puipuiga o le tino o le Adenosine ma e mafai ona fa'aitiitia ai le puipuiga mai le kanesa e ala i le poloka o le galuega a le sela T ma le fa'agaoioia o adenosine A2A receptors (A2AR) (Vigano et al., 2019). O le fa'afilemuina o le A2AR e fa'aaoga ai le CRISPR/Cas9 na fa'aleleia atili ai le aoga o sela CAR-T i totonu o le tino (Giuffrida et al., 2021). Ua iloa le iai o uiga eseese o sela T e pei o le fa'alauteleina o sela, le eseesega, le atuatuvale o le oxidative ma le atuatuvale o le genomic. O le su'esu'ega o sela T e fa'avae i le CRISPR/Cas9 na fa'aalia ai le fa'alavelaveina o kinase eseese e 25 o sela T. I totonu o ia mea, o le tapeina o le p38 kinase ua fa'aalia e fa'aleleia atili ai le gaioiga e tete'e ai i le kanesa o sela T, e fa'ailoa mai ai o le p38 kinase o se fa'atonutonu autu o le fa'atonutonuina o sela CAR-T (Gurasamy et al., 2020).
E mafai ona suia kenera sela T e faʻaaoga ai le CRISPR/Cas9 e gaosia ai ni TCR e maualuga lona faʻaalia. O le fesiitaiga o sela T ua suia kenera i gasegase ua faʻaalia ai le malosi o le gaioiga e teteʻe atu ai i le kanesa nai lo sela T e le tino. O le mea lea, e ono tauva TCR e le tino ma TCR ua suia kenera i gasegase, lea e ono aʻafia ai le gafatia o le immunotherapy o le kanesa. Ina ia foia lenei faʻafitauli, o le faʻaaogaina o le CRISPR/Cas9 e aveese ai le TCR-β e le tino i sela e maua i ai ma mulimuli ane fesiitaiga sela T TCR-β i gasegase kanesa atonu e sili atu ona lelei tali puipuia o le kanesa e aunoa ma le manaʻomia o le tauvaga feusuaʻiga a le TCR e le tino (Fan et al. 2018). O le mea lea, vagana ai sela T ua suia e le CRISPR, e afe taimi e sili atu ona maaleale TCR i antigens o le tumo nai lo sela T masani ua suia e le TCR. E le gata i lea, i leukemia eseese, o sela T ua suia na gaosia e le γδ TCR+ CRISPR e sili atu le faʻaalia o sela T CD4+ ma le CD8+ nai lo le fesiitaiga masani a le TCR (Legut et al., 2018). O le mea lea, o sela T ua suia ua gaosia e le CRISPR/Cas9 atonu o se metotia togafitiga puipuia lelei e faatoilalo ai le TNBC.
O integrins o ni molela'au pipii o sela o lo'o iai i totonu o sela transmembranes ma fa'alauiloa ai le fusifusia o sela i le extracellular matrix (ECM) (Hamidi ma Ivaska, 2018). O le le pulea o integrins e feso'ota'i ma le atina'eina o le kanesa ma le femalaga'iga e ala i le suia o le extracellular matrix, e o'o atu ai i le ola o sela o le kanesa i le ta'avale (Hamidi ma Ivaska, 2018). O le CRISPR/Cas9-mediated integrin knockdown e fa'agesegese ai le alualu i luma o le tumo, metastasis, ma le colonization i le TNBC. O le knockdown o le integrin a5 (ITGA5) ua lipotia mai e fa'aitiitia ai le femalaga'iga o sela ma le alualu i luma i isi kanesa e pei o le kanesa o le mama (Ju et al., 2017), ma fa'ailoa mai ai o le integrin a5 atonu o se mea taua i le pathogenesis o le TNBC.
O le fa'atupuina o isumu e le toe gaosia e ala i le fa'aaogaina o metotia masani o le embryonic stem (ES) cell o se faiga e tele ai galuega, tele ai le taimi, ma le le lelei. E tele masina ma tausaga e fa'atatau ai sela ES e ala i le homologous recombination, fa'afailele isumu chimeric, ona fa'afefiloi lea ma isumu heterozygous e maua ai fanau homozygous. E mana'omia le fa'afailele faigata e fa'atupu ai isumu e tele suiga o kenera. Peita'i, e tele fa'afitauli ua tula'i mai pe a fa'aaogaina isumu na faia e ala i le ablation o sela ES e fa'aaoga ai le CRISPR/Cas9 po'o le microinjecting o vaega CRISPR/Cas9 i fuamoa e tasi le sela ua fa'asusuina. Mo se fa'ata'ita'iga, o le fa'alauiloaina o suiga e masani ona tupu i biallelic loci ma e le fa'apitoa i kenera. Na lipotia talu ai nei e mafai e sela ES e fa'aaoga ai le tekinolosi CRISPR/Cas9 ona fa'aopoopoina i le taimi e tasi suiga o biallelic i totonu o le 5 kenera (Nishizono et al., 2021). Mo lenei fa'amoemoe, o le Cas9 mRNA ma le lima gene-specific gRNAs na fa'apipi'iina i le taimi e tasi i totonu o sela ES. O lenei mea e faʻamamafa ai le folafolaga ma le aoga o lenei faiga, e ui lava o nei fesuiaʻiga atonu na tuʻufaʻasolo mai ina ua faʻafaileleina laina faʻavae e gaosia ai isumu e limasefulu. O loʻo lipotia mai foʻi e le suʻesuʻega se mea na maua faʻateʻia: E le toe manaʻomia ni sela ES e fatu ai isumu ua suia faʻakeneka. Nai lo lena, ina ia aveese ni oloa faʻapitoa o kenera, na tuiina ai le Cas9 mRNA ma le gRNA i totonu o embryos o le sela e tasi. O se taunuuga, ua faia ai laina faʻavae e mafai ona faʻaaogaina faʻateorē e suʻesuʻe ai taunuuga o le tapeina o kenera i isumu (Qin et al., 2016). O le mea lea, e mafai ai e le CRISPR/Cas9 ona faia ni isumu transgenic e togafitia ai le TNBC i se tau maualalo nai lo le inisinia faʻakeneka masani. I le faʻaaogaina o le faiga CRISPR/Cas, ua atiaʻe ai se faʻataʻitaʻiga fou o isumu e mafai ona faʻalauiloa manuia ai fesuiaʻiga o le itu i le tasi pe sili atu kenera endogenous i le TNBC. E faʻavae i luga o lenei manatu, e mafai foʻi ona atiaʻe faʻataʻitaʻiga manu o le TNBC e faʻaaogaina ai le tapeina o le BRCA1 ma le p53 e ala i le CRISPR/Cas9, ma iʻu ai i le leiloa o le toe faaleleia o le HR, le le mautu o le genomic, ma phenotypes mutant (Annunziato et al., 2020).
I le taimi nei, o loʻo faʻaaogaina auala eseese e pei o le mammography, magnetic resonance imaging (MRI) ma le ultrasound e suʻesuʻeina ai le TNBC. Peitaʻi, o nei auala e iai ni ona tapulaʻa. E faʻaaogaina le mammography e suʻesuʻe ai aano o le susu i le lotoifale nai lo le metastases, lea ua siitia atu ai sela o le kanesa i isi totoga. O le Ultrasonography e le o se metotia faʻatuatuaina mo le suʻesuʻeina o le TNBC (Chen ma Lee-Felker, 2023). E sili atu le maaleale o le MRI nai lo le ultrasound ma le mammography, ae e gata lona saʻo i le suʻesuʻeina (Sha ma Chen, 2022). O le biopsy o aano o se auala faʻalavelave e iloa ai sela o le kanesa. Peitaʻi, i nisi tulaga, e ono misia e le biopsy le aano o le kanesa pe afai e se ese le nila mai le vaega e manaʻomia. E le gata i lea, e matua taugata tele ma e mafai ona afaina ai le maʻi. O le TNBC o se ituaiga kanesa eseese, o lea e ono le lava ai faʻamatalaga e maua mai i le biopsy e uiga i le ituaiga o kanesa. O le mea lea, e manaʻomia vave ai se metotia fou faʻatuatuaina mo le suʻesuʻeina o le TNBC. E mafai e le CRISPR/Cas9 ona avea o se isi auala e matua maaleale ma e itiiti le faʻalavelave mo le suʻesuʻeina o le kanesa o le susu. I lenei tulaga, e mafai ona faʻaaogaina fuafuaga faʻavae CRISPR/Cas9 e faʻaleleia atili ai metotia PCR mo le suʻesuʻeina o le TNBC. Muamua, o porotini Cas9 ma cpf1 o le faiga CRISPR e faʻaaogaina e aveese ai le DNA e le faʻapitoa, ona mafai lea e nei porotini e lua (Cas9 ma cpf1) ona iloa le faʻasologa o le PAM aʻo leʻi fusifusia i le DNA faʻamoemoeina (Deepak Singh et al., 2021). . O lea la, e mafai e le PCR ona faʻailoa mai suiga e fesoʻotaʻi ma le atinaʻeina o le kanesa. E tele suʻesuʻega ua faʻaaogaina lenei fuafuaga faʻavae CRISPR e iloa ai suiga eseese i kanesa eseese (Safari et al., 2019). O lea la, o metotia PCR faʻavae CRISPR e ono faʻaitiitia ai le faʻalagolago o le suʻesuʻeina o le TNBC i metotia faʻalavelave e pei o le immunohistochemistry faʻavae biopsy.
Ua faʻaalia foʻi suiga o le genotypic i le faʻatonutonuina o le hormone receptor i le TNBC (Chen ma Russo, 2009). O fuafuaga PCR e faʻavae i luga o le CRISPR/Cas9 e faʻaaogaina ai microarrays mo suʻesuʻega i le nofoaga e mafai ona mataʻituina lelei nei fesuiaʻiga (Hajian et al., 2019). E mafai foʻi ona tuʻuina atu i tagata e tuʻuina atu le soifua maloloina faʻamatalaga talafeagai e uiga i fesuiaʻiga patino i tagata mamaʻi TNBC, lea e mafai ona fesoasoani e faʻaleleia atili ai a latou togafitiga. Peitaʻi, o lenei metotia tuʻufaʻatasi e iai ona tapulaʻa. O le mea lea, e manaʻomia ni taumafaiga suʻesuʻega tetele aʻo leʻi faʻaaogaina lenei metotia CRISPR/Cas-PCR i le soifua maloloina mo le suʻesuʻeina o le TNBC (Yang et al., 2019).
Taimi na lafoina ai: Oke-14-2024